Seebio® T7 RNA Polymerase

本产品是重组型噬菌体T7 RNA聚合酶，来源于大肠杆菌。T7 RNA聚合酶能够识别T7启动子序列（5’-TAATACGACT CACTATAG*-3’），以双链或单链DNA为模板，以NTP为底物，催化 5’→3’ 的RNA合成。线性质粒、PCR产物均可用作体外合成RNA的模板。 

注：G*为 RNA 转录的首位碱基。

【产品特点和优势】

（1）5’→3’ RNA聚合酶活性

（2）可用于标记或非标记RNA的合成

（3）可接受生物素、地高辛、荧光蛋白标记的核苷酸作为底物用于RNA的合成

【成分】

T7 RNA polymerase (50 U/μL) 

5×Transcription Buffer  1ml

【储存缓冲液】

50mM Tris-HCl (pH 7.9)，100mM NaCl，10mM DTT，1mM EDTA，0.1% (v/v) Triton X-100和 50% (v/v) 甘油。

【5×反应缓冲液】

200mM Tris-HCl (pH 7.9，25℃)，30mM MgCl2， 50mM DTT，50mM NaCl和10mM亚精胺。

【使用建议】

1、溶解在DEPC水（AAA0014B）中的线性DNA作为模板。

2、如下配置反应混合液：

3、37℃抚育2h。

4、去除模板DNA，纯化获得转录出的RNA。

‍‍【注意事项】‍‍

1、操作及转录反应应在RNase-free环境下进行，建议戴手套，反应体系内加入RNase抑制剂等防止RNA被降解。

2、 当转录长度< 100nt时，模板量可增加至2μg。

3、为避免低温条件下DNA和亚精胺结合形成沉淀，反应混合物应在室温下制备。

4、反应混合物可按比例放大或缩小。

【运输、储存条件和有效期】

干冰运输。-20℃保存，有效期两年。