Seebio® 重组烟草蚀纹病毒蛋白酶（rTEV Protease）

【产品基本信息】

重组型TEV蛋白酶（rTEV Protease）是经过基因工程改造在大肠杆菌中重组表达带His标签(6X His tag)和纯化后的重组蛋白酶，不仅保持天然TEV酶的功能活性，且在广谱的温度范围内表现出更强的稳定性和特异性。rTEV Protease是一种用来切除融合蛋白上亲和标签的常用工具酶，具有很强的位点特异性。酶活性单位定义：

在1X rTEV Buffer（50mM Tris-HCl，pH8.0，0.1mM EDTA，1mM DTT）中，30℃条件下反应1小时，能够切割>85%的3µg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。

【产品特点】

严格识别七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S)，切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸/丝氨酸之间。普遍应用的七氨基酸序列为：Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV Protease在pH 7.0，30℃时可达到最佳活性，但在pH 6.0-8.5和温度4-30℃的广泛范围内皆有活性，使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而灵活变动。另外rTEV Protease切割后也能利用其N端的6×His标签，通过Ni-NTA树脂去除，以达到纯化目的蛋白的目的。

【应用】

用于切除融合蛋白上亲和标签。

【使用说明】

1.在1X rTEV Buffer（25mM Tris-HCl，150mM NaCl，pH8.0，0.1mM DTT）中，加入30μg融合蛋白和10μL rTEV Protease；

2.在30°C恒温反应一小时后，取50μL上述反应液，置于单独的EP管中；

3.向上述EP管中加入12.5μL 5×SDS Loading Buffer，样品煮沸5min，取10μL进行SDS-PAGE电泳分析，确定调整所需的合适酶量和反应时间。如果目的蛋白在30℃不稳定，可以考虑4℃反应过夜(16小时左右)。

【产品组分】

形式：液体25mM Tris-HCl,150mM NaCl,1mM EDTA,5mM DTT, 50%(v/v)Glycerol, pH8.0。